Título
LA DIETA ISOENERGÉTICA MUY BAJA EN CARBOHIDRATOS MEJORA EL COLESTEROL HDL EN SUERO Y LAS CONCENTRACIONES DE TRIACILGLICEROL, RELACIÓN COLESTEROL TOTAL A COLESTEROL HDL Y RESPUESTAS LIPÉMICAS PORTPRANDIAL COMPARADA CON UNA DIETA BAJA EN GRASA EN MUJERES NORMOLIPIDÉMICAS DE PESO NORMAL. (Continuación...)

Dietas experimentales. Ambas dietas experimentales se diseñaron como isoenergéticas. Los niveles de energía se asignaron en incrementos de 837 kJ (200 kcal) más cercanos, basándose en el gasto de energía en reposo obtenido durante la calorimetría indirecta al inicio del estudio y factores de actividad apropiados. Se usaron listas de intercambio diabético estándar para asegurar una energía constante y un balance de proteína macronutriente (~20% de energía), grasa (~25% de energía) y carbohidratos (~55% de energía) durante la dieta baja en grasa. Esta dieta también se diseñó para que incluyera <10% de grasa saturada y <300 mg de colesterol. Los alimentos que se podían comer en la dieta baja en grasa incluyeron granos integrales (panes, cereales y pastas), frutas y jugos de frutas, verduras, aceites vegetales y productos lácteos bajos en grasa y cárnicos. Desarrollamos listas de intercambio diabético a la medida para la dieta muy baja en carbohidratos con el fin de asegurar energía constante y balance de proteínas (~30% de energía), grasa (~60% de energía) y carbohidratos (~10% de energía) durante el día. No hubo restricciones en el tipo de grasa de fuentes saturadas e insaturadas o niveles de colesterol. Para la dieta muy baja en carbohidratos los alimentos que se consumían normalmente fueron carne de res (por ejemplo hamburguesas, filetes), aves (por ejemplo, pollo, pavo), pescado, aceites, varias nueces y semillas y mantequilla de cacahuate, cantidades moderadas de verduras, ensaladas con aderezos bajos en grasa, cantidades moderadas de quesos, huevos, proteína en polvo y agua o bebidas dietéticas bajas en carbohidratos. Se proporcionaron barras bajas en carbohidratos y malteadas (Atkins Nutritionals, Hauppauge NY) a los sujetos durante la dieta muy baja en carbohidratos. Se suministró una multivitamina/mineral al día (Top Care; Topco Assoc., Skokie, IL) que proporcionara micronutrientes a niveles = 100% de la cantidad diaria recomendada, durante ambas dietas.

Todos los sujetos recibieron instrucciones iniciales extensas y el seguimiento por parte de un dietista registrado sobre como traducir alimentos/comidas en intercambios diabéticos. A los sujetos también se les proporcionó un paquete con listas específicas de los alimentos apropiados, recetas y planes de comida de muestra que fueran compatibles con sus preferencias individuales, durante ambos períodos experimentales. Los sujetos recibieron asesorías de seguimiento cada semana durante la cual se evaluaba el cumplimiento y se proporcionaba información dietética. La masa corporal se monitoreó semanalmente y el nivel de energía se ajustó si la masa corporal fluctuaba en > 1 kg de la visita anterior.

Los sujetos recibieron instrucciones completas para llenar detalladamente los registros de alimentos pesados durante las semanas 1, 2 y 4 de cada dieta (21 d total). Se proporcionaron utensilios y balanzas para medir a los sujetos para asegurar un reporte exacto de cantidades de alimentos y bebidas consumidas. Los diarios de alimentos se analizaron par ver el contenido energético y macro/micronutriente (NUTRITIONIST PRO, Versión 1.3; First Databank, The Hearst Corporation, San Bruno, Calif.). Cuando los alimentos analizados usaban bases de datos de nutrientes estándar, la suma de grasa monoinsaturada y poliinsaturada es menor que el total de gramos de grasa presumiblemente debido a que la grasa total incluye glicerol, ácidos grasos trans, y otros componentes de lípidos menores. Para asegurarse que los carbohidratos estuvieran restringidos durante toda la dieta muy baja en carbohidratos, lo sujetos probaban su orina con tiras de reactivo en forma diaria (Bayer, Elkhart, IN). La prueba es específica para ácido acetoacético, el cual produce un cambio de color relativo cuando reacciona con nitroprusia.

Recolección de sangre. Las muestras de sangre se obtuvieron en dos días separados antes, en el punto medio y después del período de 4 semanas. Las muestras se obtuvieron después de un ayuno nocturno y abstinencia de alcohol y ejercicio pesado durante 24 horas. Los sujetos se reportaron al laboratorio entre las 7 y las 9 AM, descansaron por 10 minutos en posición supina; la muestra de sangre se obtuvo de la vena antecubital que luego se separó mediante centrifugación a 1500 x g por 15 minutos a 4ºC y se almacenó a -80ºC para su análisis posterior.

Prueba oral de tolerancia a la grasa. Se realizó una prueba oral de tolerancia a la grasa después de cada período experimental usando procedimientos estándar en nuestro laboratorio (4, 5). Los sujetos llegaban al laboratorio después de 12 horas de ayuno nocturno y abstinencia de alcohol y ejercicio pesado durante 24 horas. Se insertó un catéter flexible en la vena del antebrazo y después de un período de estabilización de 10 min, se tomaron las muestras de sangre (separadas 10 minutos) para determinar triacilgliceroles. Luego se consumía la comida de prueba (150 mL de crema batida, pudín sin azúcar, 5 mL de aceite de canola, 28.5 g de nueces de macadamia). Esta comida proporcionaba 3.55 MJ, 13% de carbohidratos, 3% de proteínas, 84% de grasa, 38 g de grasa saturada, 33 g de grasa monoinsaturada, 4 gramos de grasa poliinsaturada y 207 mg de colesterol. Las muestras de sangre postprandial se obtenían inmediatamente después de la comida y cada hora por espacio de 8 horas. Los sujetos descansaron calladamente en posición sentada y consumieron exactamente 1 litro de agua durante el período postprandial de 8 horas.

Lípidos en suero. El suero ( ~ 3 ml) se envió a un laboratorio médico certificado (Quest Diagnostics, Wallingford, CT) para la determinación de colesterol total, HDL-C y concentración de triacilglicerol usando procedimientos enzimáticos automatizados (Olympus America, melvilla, NY). Para calcular LDL-C (12) se usó la fórmula Friedwald: [LDL-C = colesterol total – (HDL-C + triacilglicerol/5)], la cual se convierte a mmol/L dividiendo entre 38.7.

Subclases LDL . El tamaño de partícula LDL se determinó usando electroforesis no gradiente de gel de poliacrilamida (Lipoprint LDL System; Quantimetrix, Redondo Beach, Calif.). El método se describió en detalle en una publicación reciente de nuestro laboratorio (5) y otros (13) y se validó contra la electroforesis gradiente no desnaturalizada y espectrometría NMR (14). Se evaluaron cuantitativamente 7 bandas de LDL, tres bandas de lipoproteína de densidad intermedia (IDL) y VLDL mediante un software de computadora (NIH imaging software, utilizando Lipoprint LDL macro). El porcentaje de LDL, IDL y VLDL.

Alta sensitividad de proteína C-reactiva (hs-CRP) y citocinas pro-inflamatorias . El plasma para la determinación de la fase aguda de reactante hs-CRP se mezcló con un diluyente para proporcionar pH óptimo y fuerza iónica para la formación de complejos antígeno-anticuerpo. La mezcla se agregó a una suspensión de cuentas de látex cubiertas con un anticuerpo específico al CEP humano y el grado de dispersión de luz se determinó en un nefelómetro Dade-Behring Modelo 2400 (Marburg, Alemania). El límite de detección del método es 0.15 mg/mL y el método es lineal hasta concentraciones de 200 mg/L. Se determinaron las citocinas proinflamatorias IL-6 y TNF- a por duplicado usando un ELISA de alta sensibilidad (HS600 y HSTA50, R&D Systems, Minneapolis, MN) con un lector VersaMax de microplaca ajustable con software de reducción de datos SoftMax Pro (Molecular Devices, Sunnyvale, Calif.). La sensibilidad del ensaye IL-6 fue 0.094 ng/L y el intra-ensaye CV fue 8.55%. La sensibilidad del ensaye TNF- a fue 0.18 ng/L y el intra-ensaye CV fue 10.97%.